酶作為高效的生物催化劑，是提升動物飼料消化利用率的核心要素。在動物機體內，天然消化酶（如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶）負責分解飼料中的大分子營養(yǎng)物質（蛋白質、碳水化合物、脂肪），將其轉化為可吸收的小分子物質。然而，常規(guī)飼料原料中常含有難以被動物自身酶解的抗營養(yǎng)因子（如植酸、非淀粉多糖NSP、纖維素等），導致營養(yǎng)物質吸收率低、飼料浪費及環(huán)境污染等問題。

外源性飼料酶的添加，能夠精準靶向這些抗營養(yǎng)因子或補充動物內源酶的不足。例如：非淀粉多糖酶可降解植物細胞壁中的阿拉伯木聚糖和β-葡聚糖，釋放被包裹的淀粉和蛋白質；植酸酶能將植酸磷轉化為可利用磷，減少無機磷添加需求；蛋白酶則可進一步分解未被消化的蛋白質殘渣。通過酶制劑的協(xié)同作用，飼料能量與養(yǎng)分釋放效率顯著提升，動物生長性能改善，同時降低糞便中氮、磷排放，實現(xiàn)經濟效益與生態(tài)效益的雙重優(yōu)化。

當前，酶制劑已成為現(xiàn)代飼料工業(yè)中提高飼料利用率、推動綠色養(yǎng)殖的關鍵技術之一，其應用價值在畜禽及水產養(yǎng)殖領域得到廣泛驗證?？藰纺嗡故墙鸢俸仙锿ㄟ^二次液態(tài)聯(lián)合發(fā)酵工藝生產的一種丁酸梭菌培養(yǎng)物，其含有豐富“菌+酶+酸+肽+益生元”等多種功能性成分，在提升動物采食量、免疫力及飼料利用率上有獨特的功效。本實驗旨在驗證丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂奈斯在產酶上的效果。

 實驗目的 

驗證丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂奈斯的產酶能力。

 實驗材料 

1、實驗器材：電子天平、恒溫培養(yǎng)箱、滅菌鍋、超凈工作臺、游標卡尺、移液槍(1mL、200μL)、試管、錐形瓶、培養(yǎng)皿（90×90mm）、槍頭(1mL、200μL)、醫(yī)用棉簽等。培養(yǎng)皿、槍頭、離心管、棉簽等需滅菌備用。

2、培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂（NA）。 

3、待測樣品：3個生產批次的丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂奈斯，批次號分別為YL-04-24-0716、2024-0620-102、20240701，本實驗中為了方便將其統(tǒng)一編號依次為1、2、3。

 實驗方法 

1、產淀粉酶實驗：準備NA培養(yǎng)基+可溶性淀粉（1g/L）平板，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取150μL 待檢樣液加入到相應孔內。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。

2、產蛋白酶實驗：本試驗采用營養(yǎng)瓊脂+脫脂奶粉（0.5%）培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取 150μL 待檢樣液加入到相應孔內。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。

3、產脂肪酶實驗：本實驗采用營養(yǎng)瓊脂+三丁酸甘油酯（0.5%）培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取150μL 待檢樣液加入到相應孔內。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。

4、產纖維素酶實驗：按照以下配方配制培養(yǎng)基：氯化鈉0.6%、硫酸銨0.2%、氯化鈣0.1‰、硫酸鎂0.1‰、磷酸二氫鉀0.5‰、磷酸氫二鉀0.2‰、羧甲基纖維素鈉1％，瓊脂1.8%，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取150μL 待檢樣液加入到相應孔內。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。用20mg/mL剛果紅染色并用1mol/L生理鹽水脫色。觀察透明圈大小。

 實驗結果 

實驗數據表明，3個不同批次的克樂奈斯產品產蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶，但不產脂肪酶。其中克樂奈斯3產蛋白酶能力最強，克樂奈斯1產淀粉酶和纖維素酶能力最強。

圖1：不同生產批次克樂奈斯產品產酶圈直徑圖片

 實驗結論 

丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂奈斯產品能夠產生生物酶，有助于提升養(yǎng)殖動物飼料消化率，助力養(yǎng)殖過程中飼料高效利用，降低動物糞便中氮、磷排放，推動動物養(yǎng)殖健康、綠色發(fā)展。

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