酶作為高效的生物催化劑，是提升動(dòng)物飼料消化利用率的核心要素。在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)，天然消化酶（如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶）負(fù)責(zé)分解飼料中的大分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪），將其轉(zhuǎn)化為可吸收的小分子物質(zhì)。然而，常規(guī)飼料原料中常含有難以被動(dòng)物自身酶解的抗?fàn)I養(yǎng)因子（如植酸、非淀粉多糖NSP、纖維素等），導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收率低、飼料浪費(fèi)及環(huán)境污染等問(wèn)題。

外源性飼料酶的添加，能夠精準(zhǔn)靶向這些抗?fàn)I養(yǎng)因子或補(bǔ)充動(dòng)物內(nèi)源酶的不足。例如：非淀粉多糖酶可降解植物細(xì)胞壁中的阿拉伯木聚糖和β-葡聚糖，釋放被包裹的淀粉和蛋白質(zhì)；植酸酶能將植酸磷轉(zhuǎn)化為可利用磷，減少無(wú)機(jī)磷添加需求；蛋白酶則可進(jìn)一步分解未被消化的蛋白質(zhì)殘?jiān)?。通過(guò)酶制劑的協(xié)同作用，飼料能量與養(yǎng)分釋放效率顯著提升，動(dòng)物生長(zhǎng)性能改善，同時(shí)降低糞便中氮、磷排放，實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)效益與生態(tài)效益的雙重優(yōu)化。

當(dāng)前，酶制劑已成為現(xiàn)代飼料工業(yè)中提高飼料利用率、推動(dòng)綠色養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)之一，其應(yīng)用價(jià)值在畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域得到廣泛驗(yàn)證?？藰?lè)奈斯是金百合生物通過(guò)二次液態(tài)聯(lián)合發(fā)酵工藝生產(chǎn)的一種丁酸梭菌培養(yǎng)物，其含有豐富“菌+酶+酸+肽+益生元”等多種功能性成分，在提升動(dòng)物采食量、免疫力及飼料利用率上有獨(dú)特的功效。本實(shí)驗(yàn)旨在驗(yàn)證丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂(lè)奈斯在產(chǎn)酶上的效果。

 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?nbsp;

驗(yàn)證丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂(lè)奈斯的產(chǎn)酶能力。

 實(shí)驗(yàn)材料 

1、實(shí)驗(yàn)器材：電子天平、恒溫培養(yǎng)箱、滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、游標(biāo)卡尺、移液槍(1mL、200μL)、試管、錐形瓶、培養(yǎng)皿（90×90mm）、槍頭(1mL、200μL)、醫(yī)用棉簽等。培養(yǎng)皿、槍頭、離心管、棉簽等需滅菌備用。

2、培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）。 

3、待測(cè)樣品：3個(gè)生產(chǎn)批次的丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂(lè)奈斯，批次號(hào)分別為YL-04-24-0716、2024-0620-102、20240701，本實(shí)驗(yàn)中為了方便將其統(tǒng)一編號(hào)依次為1、2、3。

 實(shí)驗(yàn)方法 

1、產(chǎn)淀粉酶實(shí)驗(yàn)：準(zhǔn)備N(xiāo)A培養(yǎng)基+可溶性淀粉（1g/L）平板，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無(wú)菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取150μL 待檢樣液加入到相應(yīng)孔內(nèi)。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。

2、產(chǎn)蛋白酶實(shí)驗(yàn)：本試驗(yàn)采用營(yíng)養(yǎng)瓊脂+脫脂奶粉（0.5%）培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無(wú)菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取 150μL 待檢樣液加入到相應(yīng)孔內(nèi)。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。

3、產(chǎn)脂肪酶實(shí)驗(yàn)：本實(shí)驗(yàn)采用營(yíng)養(yǎng)瓊脂+三丁酸甘油酯（0.5%）培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無(wú)菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取150μL 待檢樣液加入到相應(yīng)孔內(nèi)。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。

4、產(chǎn)纖維素酶實(shí)驗(yàn)：按照以下配方配制培養(yǎng)基：氯化鈉0.6%、硫酸銨0.2%、氯化鈣0.1‰、硫酸鎂0.1‰、磷酸二氫鉀0.5‰、磷酸氫二鉀0.2‰、羧甲基纖維素鈉1％，瓊脂1.8%，滅菌后冷卻至50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入無(wú)菌平皿中，待凝固后制成平板。然后用1mL槍頭（外徑：9mm）在平板上打孔，火焰封底備用。吸取150μL 待檢樣液加入到相應(yīng)孔內(nèi)。將接種后平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h。用20mg/mL剛果紅染色并用1mol/L生理鹽水脫色。觀察透明圈大小。

 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，3個(gè)不同批次的克樂(lè)奈斯產(chǎn)品產(chǎn)蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶，但不產(chǎn)脂肪酶。其中克樂(lè)奈斯3產(chǎn)蛋白酶能力最強(qiáng)，克樂(lè)奈斯1產(chǎn)淀粉酶和纖維素酶能力最強(qiáng)。

圖1：不同生產(chǎn)批次克樂(lè)奈斯產(chǎn)品產(chǎn)酶圈直徑圖片

 實(shí)驗(yàn)結(jié)論 

丁酸梭菌培養(yǎng)物克樂(lè)奈斯產(chǎn)品能夠產(chǎn)生生物酶，有助于提升養(yǎng)殖動(dòng)物飼料消化率，助力養(yǎng)殖過(guò)程中飼料高效利用，降低動(dòng)物糞便中氮、磷排放，推動(dòng)動(dòng)物養(yǎng)殖健康、綠色發(fā)展。

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