人源諾如病毒(Human norovirus,HuNoV)是全球食源性疾病的首要病原體,近期諾如病毒疫情頻頻暴發(fā)。其傳播途徑包括糞口途徑,飲用受污染的水、食用受污染的水果、蔬菜及貝類(lèi)等。目前傳統(tǒng)分子檢測(cè)方法僅能檢測(cè)病毒RNA,無(wú)法區(qū)分感染性與非感染性病毒顆粒,這嚴(yán)重限制了公共衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的準(zhǔn)確性。
2016年,人類(lèi)腸道類(lèi)器官(Human Intestinal Enteroids, HIE)培養(yǎng)技術(shù)的突破,使得HuNoV的體外感染性檢測(cè)成為可能。HIE模擬腸道上皮的3D結(jié)構(gòu),能夠支持HuNoV的復(fù)制,并通過(guò)病毒RNA的顯著增長(zhǎng)(≥0.5 log)判斷感染性。這一技術(shù)為研究HuNoV在環(huán)境中的真實(shí)存活能力提供了有效工具。
美國(guó)佐治亞大學(xué)科研團(tuán)隊(duì)在《Science of the Total Environment》發(fā)表的最新研究中,將HIE技術(shù)應(yīng)用于評(píng)估HuNoV在淡水中的持久性。研究選取三個(gè)農(nóng)業(yè)灌溉池塘的淡水樣本,構(gòu)建淡水微生物模型,并模擬自然晝夜環(huán)境條件,將GII.4 Sydney [P31]毒株(感染性經(jīng)HIE驗(yàn)證)以5.8 log GE/ml的濃度加入淡水樣本,利用HIE感染模型,通過(guò)72小時(shí)內(nèi)病毒RNA增長(zhǎng)量(≥0.5 log)判定感染性。
圖文摘要[1]
三個(gè)池塘的結(jié)果顯示HuNoV在淡水中的感染性持久性存在顯著差異,Pond I:感染性維持≥7天,第14天降至檢測(cè)限以下;Pond II:感染性在第1天即消失;Pond III:感染性持續(xù)至第7天。進(jìn)一步分析表明,溶解氧水平(%)與完整衣殼的HuNoV RNA滴度呈正相關(guān),高溶解氧可能通過(guò)氧化作用破壞病毒衣殼,或間接調(diào)控微生物群落活性,加速病毒失活。細(xì)菌數(shù)量與病毒存活呈顯著負(fù)相關(guān),這一現(xiàn)象可能歸因于細(xì)菌分泌的蛋白酶對(duì)病毒衣殼的降解作用,此前研究已在腸道病毒中觀察到類(lèi)似機(jī)制。
盡管HIE突破了感染性檢測(cè)的瓶頸,但其高成本、復(fù)雜操作及檢測(cè)限(3.9 log GE/ml)限制了在低病毒載量環(huán)境樣本中的應(yīng)用。未來(lái)仍然需要開(kāi)發(fā)自動(dòng)化檢測(cè)平臺(tái),可結(jié)合宏基因組技術(shù)解析淡水微生物群落對(duì)病毒存活的綜合影響。
參考文獻(xiàn):[1] Esseili MA, Narwankar R, Hooda R, Costantini V, Estes MK, Vinjé J, Kassem II. Human intestinal enteroids for evaluating the persistence of infectious human norovirus in raw surface freshwater. Sci Total Environ. 2025, 5;966:178707.
來(lái)源:微生物安全與健康網(wǎng),作者~高珺珊。