丙烯酰胺是國際癌癥研究中心認定的 “2A 類致癌物”,常見于薯條、咖啡、面包等油炸、烘焙食品中,具有神經(jīng)毒性、致癌性和致突變性。現(xiàn)有檢測方法如酶聯(lián)免疫吸附測定、質(zhì)譜、電化學(xué)分析和氣相色譜 - 質(zhì)譜等存在儀器昂貴、操作復(fù)雜、預(yù)處理繁瑣等問題,難以滿足快速、低成本、超靈敏的檢測需求,因此開發(fā)新型檢測策略具有重要意義。
研究團隊通過水熱法合成了具有氧化酶模擬活性的 Cu-CN SANs。在酸性條件下,該納米酶可催化無色底物 3,3',5,5'- 四甲基聯(lián)苯胺(TMB)氧化生成藍色產(chǎn)物 oxTMB。當體系中存在谷胱甘肽(GSH)時,其巰基會抑制納米酶活性,溶液顏色褪為無色;而丙烯酰胺的加入會通過巰基 - 烯邁克爾加成反應(yīng)消耗 GSH,使納米酶活性恢復(fù),溶液重新變?yōu)樗{色,形成 “off-on” 型比色響應(yīng)。
圖 1:TEM 及 AC-HAADF-STEM 顯示 Cu-CN 單原子納米酶為八面體結(jié)構(gòu),銅單原子均勻分散于碳載體,元素映射證實 Cu、N、C 分布。
圖 2:XRD、拉曼光譜和 XPS 表明材料具氮摻雜石墨碳結(jié)構(gòu),銅以單原子形式存在并形成 Cu-Nx 活性位點。
該方法對丙烯酰胺的線性檢測范圍為 0.05-15 μM,檢測限低至 15.4 nM,相對標準偏差(RSD%)低于 4.3%。在面包、餅干、薯片等實際食品樣本中,加標回收率達 95.3%-103.6%,與高效液相色譜(HPLC)結(jié)果吻合良好。選擇性實驗表明,丙烯酸、咖啡酸等結(jié)構(gòu)類似物幾乎不干擾檢測,證實了方法的特異性。
圖 3:紫外 - 可見光譜驗證 “off-on” 比色機制,GSH 抑制催化,丙烯酰胺加入后恢復(fù) TMB 氧化顯色。
圖 4:動力學(xué)分析顯示 Cu-CN 單原子納米酶對 TMB 催化效率高,米氏常數(shù)低。
研究團隊進一步開發(fā)了便攜式檢測平臺,將反應(yīng)體系集成至試紙條,通過智能手機 ColorAssist 應(yīng)用分析顏色變化的 RGB 值。結(jié)果顯示,(G+B)/2R 比值與丙烯酰胺濃度在 0.25-20 μM 范圍內(nèi)呈良好線性,檢測限為 146 nM。試紙條在 4℃干燥環(huán)境下儲存 10 天后仍保持穩(wěn)定性能,適用于現(xiàn)場快速篩查。
圖 5:檢測性能數(shù)據(jù)表明線性范圍 0.05–15 μM,檢測限 15.4 nM,選擇性和穩(wěn)定性良好。
圖 6:智能手機檢測平臺通過試紙條顏色 RGB 值分析丙烯酰胺濃度,檢測限 146 nM,試紙條儲存穩(wěn)定。
與傳統(tǒng)檢測方法(如質(zhì)譜、電化學(xué)分析)相比,該策略無需昂貴儀器,操作簡單且成本低廉,結(jié)合單原子納米酶的高催化效率和智能手機的便攜性,為食品中痕量丙烯酰胺的實時監(jiān)測提供了新范式。未來研究將聚焦于優(yōu)化圖像分析算法,拓展單原子納米酶在其他食品污染物檢測中的應(yīng)用。
參考文獻:Ge J, Sun X, Li X, et al. Smartphone-assisted ultrasensitive colorimetric strategy based on Cu-CN single-atom nanozyme for acrylamide detection in fried food[J]. Food Chemistry, 2025: 145066.
來源:微生物安全與健康網(wǎng),作者~徐禮龍。