在微生物培養(yǎng)過程中,如何判斷雜菌污染?
發(fā)布時間:2024-12-18 瀏覽次數(shù):1005
在微生物培養(yǎng)過程中,判斷雜菌污染的方法有多種,以下是一些常用的判斷方法:
一、觀察培養(yǎng)物的生長情況
1、觀察培養(yǎng)基顏色變化:若培養(yǎng)基顏色發(fā)生異常變化,如由紅色變?yōu)辄S色或產(chǎn)生渾濁,可能是雜菌污染的表現(xiàn)。
2、檢查菌落形態(tài):在平板培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)上,若發(fā)現(xiàn)有異常菌落出現(xiàn),如菌落形態(tài)、顏色、大小與生產(chǎn)菌不同,可能是雜菌污染。
二、顯微鏡檢查法
1、革蘭氏染色:對樣品進行涂片、染色,然后在顯微鏡下觀察微生物的形態(tài)特征。若發(fā)現(xiàn)有與生產(chǎn)菌形態(tài)特征不一樣的其他微生物存在,即可判斷為雜菌污染。
2、芽孢染色或鞭毛染色:在染菌初期,雜菌數(shù)量較少,形態(tài)特征不明顯時,可進行芽孢染色或鞭毛染色,以更準(zhǔn)確地識別雜菌。
三、生化指標(biāo)檢測
1、檢測耗氧量:當(dāng)雜菌污染時,如果污染的是好氣性雜菌,會使溶解氧在較短的時間內(nèi)下降,甚至接近零,且長時間不能回升。如果污染的是非好氣菌,生產(chǎn)菌的代謝由于受污染而遭抑制時,會使耗氧量減少,發(fā)酵液中的溶解氧會升高。
2、檢測pH值變化:某些雜菌的代謝活動會改變培養(yǎng)基的pH值,因此可以通過檢測pH值的變化來判斷是否發(fā)生雜菌污染。
四、其他檢測方法
1、噬菌體檢查:
若懷疑發(fā)酵液被噬菌體污染,可采用雙層平板法、單層平板法、平板交叉劃線法或快速檢測法進行檢查。
若連續(xù)三次樣品的檢查中都發(fā)現(xiàn)噬菌斑,即可判斷為感染噬菌體。
2、無菌試驗:無菌試驗是判斷染菌的主要依據(jù)之一,可以通過培養(yǎng)液的顯微鏡檢查、培養(yǎng)液的生化指標(biāo)變化情況等方法來判斷培養(yǎng)液是否污染雜菌。
五、注意事項
1、定期檢查:在培養(yǎng)過程中,應(yīng)定期檢查培養(yǎng)物的生長情況,以及時發(fā)現(xiàn)雜菌污染。
2、無菌操作:在進行接種、培養(yǎng)等操作時,應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,避免雜菌污染。
3、培養(yǎng)基質(zhì)量:確保培養(yǎng)基的質(zhì)量,避免培養(yǎng)基本身攜帶雜菌。
4、設(shè)備清潔與維護:定期清潔和維護培養(yǎng)設(shè)備,避免設(shè)備成為雜菌污染的源頭。
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